GST是由一系列同工酶组成的一个家族,可分为5种基因家族,其中有4种在胞浆中,为α、π、μ、θ。另一种为结合在胞膜上的微粒体GST[5]。GST不仅能够催化一系列的疏水亲电子化合物,如胆红素、胆酸、类固醇激素、致癌物质与谷胱甘肽(GSH)进行结合,以促进这些化合物的转变、代谢、解毒和排泄,而且GST本身还可以与亲脂性细胞毒药物结合增加其水溶性,促进其排泄,降低抗肿瘤化疗药物的细胞毒作用,保护免受细胞毒的损害[6]。GSTπ与恶性肿瘤的关系最为密切,其减弱化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用,是在肿瘤组织中通过催化方式降解药物,并且还可抑制烷化剂等化疗药物引起的癌细胞DNA交联,从而造成癌细胞耐药,其高表达对化疗耐药有重要影响[7]。
在本实验中,ADM作用5h或10h后胞质GSTπ灰度无明显变化,其灰度与对照组相比虽然稍降低,但二者相比较无显著性差异(P>0.05)。ADM对胞核中GSTπ的影响明显,作用5h胞核中GSTπ含量增高甚至比对照组中胞核含量还要高,10h组含量明显降低(P<0.05)。实验结果说明,ADM对蛋白质代谢和基因功能有明显影响并随时间变化,胞核中GSTπ含量变化较明显,阿霉素抗肿瘤作用机理复杂,有待于进一步研究。
2.2 免疫组化结果
表1 阿霉素对胃癌细胞GSTπ表达的影响 (灰度值)注:*与对照组和10h组比较有显著性差异(P<0.01)
3 讨论
阿霉素是一种广谱、高效的抗肿瘤抗生素,在多种肿瘤的化学治疗中占有重要的地位。关于阿霉素的药理作用机制,目前主要有两种观点:一种观点认为ADM直接与DNA相互作用(即经典的嵌入结合)而导致对DNA复制及转录过程的抑制[2];另一种观点认为ADM可诱导氧自由基的形成,从而导致对核酸的切割[3]。近有学者采用DNA修饰的金电极表面电化学方法对AMD与DNA相互作用进行了研究[4],结果发现,在酸性溶液中,AMD带正电荷,dsDNA带负电荷,两者之间的相互作用主要是静电结合,随着pH值的增加,在中性溶液中,AMD与dsDNA的相互作用是嵌入结合。BGC?823细胞突起消失,胞质中空泡增多,可能与AMD与癌细胞中的DNA作用所致。
GST是由一系列同工酶组成的一个家族,可分为5种基因家族,其中有4种在胞浆中,为α、π、μ、θ。另一种为结合在胞膜上的微粒体GST[5]。GST不仅能够催化一系列的疏水亲电子化合物,如胆红素、胆酸、类固醇激素、致癌物质与谷胱甘肽(GSH)进行结合,以促进这些化合物的转变、代谢、解毒和排泄,而且GST本身还可以与亲脂性细胞毒药物结合增加其水溶性,促进其排泄,降低抗肿瘤化疗药物的细胞毒作用,保护免受细胞毒的损害[6]。GSTπ与恶性肿瘤的关系最为密切,其减弱化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用,是在肿瘤组织中通过催化方式降解药物,并且还可抑制烷化剂等化疗药物引起的癌细胞DNA交联,从而造成癌细胞耐药,其高表达对化疗耐药有重要影响[7]。
在本实验中,ADM作用5h或10h后胞质GSTπ灰度无明显变化,其灰度与对照组相比虽然稍降低,但二者相比较无显著性差异(P>0.05)。ADM对胞核中GSTπ的影响明显,作用5h胞核中GSTπ含量增高甚至比对照组中胞核含量还要高,10h组含量明显降低(P<0.05)。实验结果说明,ADM对蛋白质代谢和基因功能有明显影响并随时间变化,胞核中GSTπ含量变化较明显,阿霉素抗肿瘤作用机理复杂,有待于进一步研究。
【参考文献】
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6 董继俊,耿振宏,李方广,等.P?糖蛋白,GST及TOPOII在胃癌组织中的表达及意义\[J\].山东医药杂志,2003,43(15):44?45
7 刘丽梅,闫晓初,郭德玉,等.耐药表型GST?π、P?gp及TopoII在大肠癌中的表达及其临床意义\[J\].消化外科杂志,2004,3(2):118?121